一般pcr体系中必备的几项是 引物 模板（DNA）mix(包含酶以及离子等) 和水。

首先是确定的总体积，可以选择10ul, 20ul, 50ul等。其次是根据mix，算出总体积中mix使用的体积。根据自己提取或者逆转录得到的DNA浓度，以及一次pcr反应所使用模板的量，计算出DNA的体积。根据引物浓度以及引物使用的终浓度，计算出引物使用的量。最后用总体积减去上面几部分的体积，得到的就是水的体积。