Western Blot为什么必须要用内参
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Western Blot为什么必须要用内参希望能解答下
专业回答
在 Western Blot 中使用内参其实就是在 WB 过程中另外用内参对应的抗体检测内参，这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达，由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定，借助检测每个样品内参的量就可以用于校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。
此外使用内参可以作为空白对照，检测蛋白转膜情况是否完全、整个 Western Blot 显色或者发光体系是否正常。常用的蛋白质内参有 GAPDH 和细胞骨架蛋白 beta-actin 或 beta-tubulin。 一般要选择一个在处理因素作用的条件下蛋白含量不会发生改变的蛋白作内参。——厚百 Western Blot试剂以下是常见的内参：内参名称分子量大小适用范围Beta-actin43 kDa胞浆和全细胞GAPDH30-40 kDa胞浆和全细胞Tubulin55 kDa胞浆和全细胞VCDA1/Porin31 kDa线粒体COXIV16 kDa线粒体Lamin B166 kDa细胞核TBP38 kDa细胞核
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