1、RT-PCR: RT-PCR 原理:首先提起RNA,然后用逆转录酶与MRNA为模板进行CDNA第一链的合成,然后的原理和PCR就一样了! RT-PCR意义:RT-PCR是个半定量的试验,可以确定在MRNA水平的表达差异,即在转录水平 !2、免疫PCR(immuno polymerase chain reaction , IPCR IPCR原理:是用一段已知DNA 分子标记抗体作为探针,用此探针与待测抗原反应,PCR 扩增粘附在抗原抗体复合物上的这段DNA 分子,电泳定性,根据特异性PCR 产物的有无,来判断待测抗原是否存在。
IPCR意义:免疫PCR 是迄今最敏感的一种抗原检测方法,理论上可以检测单个抗原分子,但实践中它的敏感性受许多因素的影响,如连接分子、显示系统的选择、DNA 报告分子的浓度、PCR 循环次数等。IPCR结合了酶联免疫分析的多功能性和PCR的扩增能力和灵敏性。其结果,ELISA的最低的检测限度被扩大了100-10000倍。由于PCR 产物在抗原量未达到饱和前与抗原抗体复合物的量成正比,因此免疫PCR 还可用于抗原的半定量试验。