pcr温度设定主要是4个依据:
1. DNA变性温度,这个一般而言94~98℃都能保证DNA完全变性,双链分开;2.DNA复性,这个主要是指引物与模板DNA的复性,通过碱基配对形成双链DNA,因此,复性温度因引物不同而有差别;3.DNA聚合酶活性,这个来源不同,不同突变,略有差异,一般65~72℃。
4.DNA 保存温度,一般情况下DNA在4~15℃可以稳定保存一定时间。因此,pcr结束后保持在这个温度均可。